大肠菌群检测操作步骤
1 水样稀释
检测所需水样为100mL。若水样污染严重，可对水样进行稀释。取10 mL水样加入到90 mL无菌水中，必要时可加大稀释度，水样按照10倍逐级稀释。
2 定性反应
用100 mL的无菌稀释瓶量取100 mL水样，加入培养基粉末，混摇均匀使之完全溶解后，放入44.5℃的培养箱内培养24h。
3 51孔定量盘法
3.1 用100 mL的无菌稀释瓶量取100 mL水样，加入培养基粉末，混摇均匀使之完全溶解。
3.2 将前述100mL水样全部倒入51孔无菌定量盘内，以手抚平定量盘背面以赶除孔气泡，然后用程控定量封口机封口。放入44.5℃的培养箱内培养24h。
3.3 无需稀释检测范围：1-200MPN/100mL粪大肠菌群（耐热大肠菌群）
4 97孔定量盘法
4.1 将100mL水样全部倒入97孔无菌定量盘内，其余步骤与6.3.1、6.3.2条款相同。
4.2 无需稀释检测范围：1-2419MPN/100mL粪大肠菌群（耐热大肠菌群）
酶底物法封口机优势特点
酶底物法检测为GB5750-2006、HJ1001-2018收录的用于大肠检测的标准方法，是目前水中大肠检测的方法。凭借方便快捷、假阳性低、适用大量样品快速检测等显著优势，正逐步被国内检测部门所认可。
相对于多管发酵和滤膜法，酶底物法检测步骤大大减少，而且对实验环境要求不高。检测时间可减少到24小时，在日常水样监测及应急监测中具有很好的应用前景。可及时检测、预防，很大限度地降低重大公共安全事故的发生几率。
酶底物法检测工作原理酶底物法使用ONPG和MUG两种营养生长指示剂，其中ONPG试剂在36℃的培养基中会被总大肠菌群产生的特异性β-半乳糖苷酶分解代谢，使水样从无色变为黄色，在44.5℃的培养基中会被粪大肠菌群(耐热大肠菌群)产生的特异性β-半乳糖苷酶分解代谢，使水样从无色变为黄色，MUG试剂在36℃的培养基中会被大肠埃希氏菌产生的特异性β-葡糖醛酸酶分解代谢，使水样在紫外灯下发出荧光，从而实现水质大肠菌群的检测。